B27无血清培养基的基本配方:
基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长。
B27无血清培养基的优点:
1)避免血清不同批次间的质量差异,提高细胞培养实验结果的一致性。
2)避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。
3)避免血清组分对实验研究的影响。
4)有利于体外培养细胞的分化。
5)可提高目的蛋白的表达量并使产品易于分离纯化。
6)组分稳定,可大量生产。
7)不含有丝分裂原抑制剂,可以促进细胞增殖。
B27无血清培养基的使用方法:
血清仍是动物细胞培养中基本的的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液。细胞转入培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。在实验后这些细胞一般不再继续保留,很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的。
细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化。