发光底物HRP有哪些使用要点？

　　发光底物HRP基于增强型化学发光底物研制而成，在HRP的催化下发生化学反应而发光，可用于检测人血清或血浆中的病毒表面抗原。其高灵敏度能够检测低皮克级别的抗原，发光信号强烈持久，可以使用微孔板式化学发光检测仪进行测定。

 

　　发光底物HRP是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂，采用发光底物系统，并对成份进行了优化。产品背景低，稳定性好，信号的灵敏度及强度高，发光时间持久。比普通ECL试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶（HRP）催化发生化学反应，发出荧光，可对X光胶片曝光，也可直接进行检测或者荧光CCD扫描。

 

　　发光底物HRP的使用要点：

　　•ECLA液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。

 

　　•即用即配，用多少配多少，混合配好的ECL工作液可以在4度避光稳定保存7天。

 

　　•为避免产生高背景，应全程佩戴手套处理转印膜。

 

　　•使用平头镊子夹取转印膜，避免膜撕裂或留下夹痕。

 

　　•切勿在任何封闭液或洗涤液中添加抑制剂，会抑制HRP活性。

 

　　•根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。曝光时间过长会使背景加深，曝光不足会导致条带模糊。

 

　　•如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液或者抗体剥离液Reblot洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL发光和曝光。

 

　　•使用高质量保鲜膜。