sigma蛋白酶k使用方法

sigma蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验，例如基因组DNA抽提、酶的消化去等。

酶活力，>30U/mg。在37℃，以血红蛋白为底物，1分钟内可以产生相当于1微摩尔酪氨酸Folin阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量，定义为一个单位sigma蛋白酶k酶活力。

在很宽的pH范围内有效，有效的pH范围为pH4.0-12.5，*pH范围为pH7.5-8.0。

sigma蛋白酶k的*反应温度为65℃，但在65℃或更高的温度sigma蛋白酶k自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。

在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下，蛋白酶K显示更高的酶活性。sigma蛋白酶k的常用工作浓度为0.05-1mg/ml，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。

 

sigma蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。sigma蛋白酶k不被金属离子、螯合剂、巯基试剂或胰蛋白酶/麋蛋白酶蛋白抑制剂失活。sigma蛋白酶k也是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。

 

sigma蛋白酶k使用：

孵育温度为55至65℃，sigma蛋白酶k在65ºC 的活性比 25ºC的活性高12倍。在温度65 ºC 之上迅速变性。在95ºC 加热10分钟、使用PMSF等蛋白酶抑制剂或用苯酚/氯仿抽提均可失活。理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。