SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

简要描述：货　　号：P0500
名　　称：SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应
规　　格：50T
价　　格：460.00

产品型号：

所属分类：其他自产即用试剂

更新时间：2024-01-07

厂商性质：经销商

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详情介绍

SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

名称	规格	保存条件
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）	1ml	-20度
Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液	一包（10L）	RT
30%丙烯酰胺(29:1)	100mlX2	2-8度
1.5mol/LTris(pH8.8)	100mlX2	RT
1.0mol/LTris(pH6.8)	60ml	RT
过硫酸铵干粉	2g	RT
10%SDS	10ml	RT
TEMED	1.5ml	RT
说明书	一份	一份

产品简介

本公司提供的蛋白电泳套装包含凝胶制备，蛋白上样缓冲液及蛋白电泳上样缓冲液。

本公司生产的SDS-PAGE蛋白电泳套装是按照经典方法配制而成。本套装根据电泳体系的大小，可进行约50次左右。

SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

使用说明：

一，前期工作：蛋白提取及定量。

二，蛋白上样液的制备：蛋白上样缓冲液解冻，轻轻混匀，按4体积蛋白样品加入一体积的5×蛋白上样缓冲液，混匀，沸水中水浴5分钟。

三，电泳液的配制：将一包电泳液干粉全部倒入1L－2L的烧柄中，加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液，用前再稀释5倍或者先配成1L成为10×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液，用前再稀释10倍。

四，取10-15支1.5ml离心管，将过硫酸铵干粉分装成100mg/支，标记好备用。

五，凝胶制备：

1，取一支称好的100mg过硫酸铵干粉，加入1ml蒸馏水，混匀，此配好的10%过硫酸铵溶液2－8度可保存一周，一周后请用新的。洗干净电泳玻璃板，夹好。

2，根据目标蛋白分子量大小，选取凝胶浓度，按下表配制。先配分离胶，再配浓缩胶。

	分离胶15%	分离胶12%	分离胶10%	分离胶8%	浓缩胶（5%）
总体积	10ml	10ml	10ml	10ml	5ml
30%丙烯酰胺(29:1)	5ml	4ml	3.3ml	2.7ml	0.83ml
1M Tris-HCL (PH6.8)	0	0	0	0	0.625ml
1.5M Tris-HCL(PH8.8)	2.5ml	2.5ml	2.5ml	2.5ml	0
10%SDS	100ul	100ul	100ul	100ul	50ul
ddH2O	2.3ml	3.3ml	4.0ml	4.6ml	3.42ml
10%过硫酸铵	100ul	100ul	100ul	100ul	75ul
TEMED	10ul	10ul	10ul	10ul	7.5ul

注意：

1，TEMED和10%过硫酸铵zui后加，在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在4℃有效期为一周，TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固，如温度过低，可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后，轻轻的加1ml ddH2O封上层，胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前，先倾去水层，再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后，放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔)，轻轻的拨出梳子，可防加样孔变形。

2，配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同，可自行调整，主要是调整30%丙烯酰胺的量（需要浓度×总体积/30%），zui后用水补足总体积。

六，上样，电泳，一般是浓缩胶80V，分离胶120V恒压，等溴酚兰电泳到合适的位置，结束电泳，染色或者进行下一步实验。

附：SDS-PAGE分离胶的浓度与*分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度	*分离范围
6%胶	57-212kD
8%胶	36-94kD
10%胶	20-80kD
12%胶	12-60kD
15%胶	10-43kD

配制6%的PAGE分离胶

成分	所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积	5	10	15	20	25	30
蒸馏水	2.6	5.3	7.9	10.6	13.2	15.9
30%丙烯酰胺混合液	1.0	2.0	3.0	4.0	5	6.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.004	0.008	0.012	0.016	0.02	0.024

配制8%的PAGE分离胶

成分	所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积	5	10	15	20	25	30
蒸馏水	2.3	4.6	6.9	9.3	11.5	13.9
30%丙烯酰胺混合液	1.3	2.7	4.0	5.3	6.7	8.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.003	0.006	0.009	0.012	0.015	0.018

配制10%的PAGE分离胶

成分	所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积	5	10	15	20	25	30
蒸馏水	1.9	4.0	5.9	7.9	9.9	11.9
30%丙烯酰胺混合液	1.7	3.3	5.0	6.7	8.3	10.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.01	0.012

配制12%的PAGE分离胶

成分	所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积	5	10	15	20	25	30
蒸馏水	1.6	3.3	4.9	6.6	8.2	9.9
30%丙烯酰胺混合液	2.0	4.0	6.0	8.0	10.0	12.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.015	0.2	0.25	0.3
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.015	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.01	0.012

配制15%的PAGE分离胶

成分	所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积	5	10	15	20	25	30
蒸馏水	1.1	2.3	3.4	4.6	5.7	6.9
30%丙烯酰胺混合液	2.5	5.0	7.5	10.0	12.5	15.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%过硫酸铵	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.001	0.012

3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)

配制不同体积的浓缩胶

成分	所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积	2	3	4	5	6	8
蒸馏水	1.4	2.1	2.7	3.4	4.1	5.5
30%丙烯酰胺混合液	0.33	0.5	0.67	0.83	1.0	1.3
1.0mol/L Tris(pH6.8)	0.25	0.38	0.5	0.63	0.75	1.0
10%SDS	0.02	0.03	0.04	0.05	0.06	0.08
10%过硫酸铵	0.02	0.03	0.04	0.05	0.06	0.08
TEMED	0.002	0.003	0.004	0.005	0.006	0.008

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