SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 BL508A

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 BL508A 现货

SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒 产品编号 产品名称 规格 BL508A SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒 50T 别名：SDS-PAGE Gel Kit 产品简介： SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒提供了配制 SDS-PAGE 凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制 胶器具和蒸馏水，即可配制 PAGE 胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒不仅可用于配制 SDS-PAGE 凝胶，也可用于配制非变性 (native)PAGE 凝胶。 本试剂盒约可配制 30-50 块常规大小的 PAGE 胶。 产品组分： 产品编号 产品名称 规格 保存条件 BL508A-1 30% Acr-Bis (29:1) 100 ml 4℃ BL508A-2 1M Tris-HCl, pH8.8 100 ml RT BL508A-3 10% SDS 5 ml RT BL508A-4 Ammonium persulfate (过硫酸铵) 0.5 g RT BL508A-5 TEMED 0.5 ml 4℃，避光 BL508A-6 1M Tris-HCl, pH6.8 15 ml RT 使用说明： 一、配制分离胶 1、根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制 SDS-PAGE 的分离胶(即下层胶)： 不同浓度的 SDS-PAGE 分离胶的*分离范围 SDS-PAGE 分离胶浓度 *分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 配制分离胶前，根据以下配方准备 10% APS： 10% APS 配制-5 ml：将 0.5 gAPS 干粉溶于 5 ml 灭菌水中，*溶解后分装，1 ml/支， -20℃备存，每次取一管使用。10% APS 应尽量减少室温存放时间，以防失效。10%APS 在 4℃ 有效期为一周，-20℃有效期 6 个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20 度保 存的 10%APS。 2、制备分离胶步骤： （1）参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。 （2）根据表二，将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合；先后加入 TEMED 和 10%APS， 轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡

（3）在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液（对于 mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶 端 1.5 cm 或距梳齿约 0.5 cm 即可），然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层 1-5 cm 的水层，使 凝胶表面保持平整。 （4）静置 30-60 分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合。 注：凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚 合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节 APS 的加入量。 SDS-PAGE 分离胶配方表 组份 不同凝胶体积对应各组份的取样量（ml） 8%胶 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 1.7 3.3 5 6.7 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 1.3 2.7 4 5.3 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.005 0.01 0.015 0.02 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2 10%胶 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 1.3 2.7 4 5.3 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 1.7 3.3 5 6.7 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.005 0.01 0.015 0.02 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2 12%胶 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 1 2 3 4 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 2 4 6 8 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2 15%胶 5ml 10ml 15ml 20ml H2O 0.5 1 1.5 2 1M Tris pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 30％ PAA（29:1） 2.5 5 7.5 10 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 10％ APS 0.05 0.1 0.15 0.2

注：如果配制非变性胶，参考上述配方，不加 10%SDS 即可配制成非变性 PAGE 胶。 二、浓缩胶制备： 1、去除覆盖在分离胶上的水层。 2、按照表三将不同成分在一个小烧杯或试管中混合；先后加入 TEMED 和 10%过硫酸铵， 轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。 3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。 4、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。 5、静置 30-60 分钟，等待浓缩胶聚合。 注：凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚 合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节 APS 的加入量。 SDS-PAGE 浓缩胶(5%)配方表 组份 不同凝胶体积对应各组份的取样量（ml） 2 ml 4 ml 6 ml 10 ml H2O 1.4 2.7 4.1 6.8 30% PAA（29:1） 0.33 0.67 1 1.7 1M Tris pH6.8 0.25 0.5 0.75 1.25 10% SDS 0.02 0.04 0.06 0.1 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.01 10% APS 0.02 0.04 0.06 0.1 注意事项： 1、过硫酸铵配制成 10%溶液后，应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防 失效。 2、TEMED 易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切， 可通过适当调节 TEMED 的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 保存条件： 1M Tris-HCl, pH8.8、10% SDS、Ammonnium persulfate (过硫酸铵)和 1M Tris-HCl， pH6.8 室温保存。30% Acr-Bis (29:1)和 TEMED 4℃避光保存。过硫酸铵配制成 10%溶液后， 分装成小管-20℃保存，半年内有效。

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